Сюжет фильма держится в секрете. Однако известно, что авторы берут за основу оригинальный комикс издательства DC, где супергероини сражаются с главные злодеем преступного мира Готэма — бизнесменом Романом Сионисом.
К роли Харли Квинн вернется Марго Робби, также в картине сыграют Джерни Смоллетт, Мэри Элизабет Уинстэд, Али Вонг, а роль злодея исполнит Юэн Макгрегор.